واکسن نوترکیب گیاهی معمولا دربرگیرنده یک یا چند زیر واحد از پروتئین آنتی ژن یک عامل مولد بیماری می باشد. که میتواند باعث تحریک سیستم ایمنی شود و در واقع واکسن نوترکیب گیاهی باعث ایجاد مصونیت در برابر بیماری میشود، همچنین مشکلات مربوط به خطرات مواد غذایی از جمله اثرات سمی باقیمانده آنتی بیوتیکها در مواد غذایی و محصولات حیوانی (گوشت، تخم مرغ و شیر) و نیز خطر وجود پاتوژنهای انسانی و حیوانی را ندارد.
بیماری ویروسی نکروز عفونی مراکز خونساز ماهی قزلآلا (IHNV) در ماهی قزل آلا سالیانه خسارات بسیار هنگفتی را به بخش تولید ماهیان سرد آبی در جهان میزند.
G ویروس نکروز عفونی مراکز خونساز جهت بیان در سیستم گیاهی کلون گردید و بعد از انتقال موقت به گیاه، بیان پروتئین نوترکیب مورد بررسی قرار گرفت. برای ساخت سیستم تظاهر ژن G، ژن G موجود در پلاسمید pCDNA تکثیر و جداسازی گردید. سپس ژن G و پلاسمید pPZPY122 با آنزیمهای برشی BamHI و KpnI برش خورده و لایگیشن انجام شد. سپس پلاسمید نوترکیب در باکتری E.coli سویه DH5α کلون گردید. برای بررسی کارایی سیستم بیانی ساخته شده ابتدا پلاسمید نوترکیب استخراج و به اگروباکتریوم سویه GV منتقل و سپس با استفاده از روش اگرواینفیلتریشن به گیاه لوبیا انتقال داده شد.
کاربرد:
تولید واکسن نوترکیب بر علیه بیماری ویروسی نکروز عفونی مراکز خونساز میتواند راه کار بسیار مفیدی جهت مقابله و ایجاد ایمنی در ماهیان باشد. با توجه به اهمیت اقتصادی و کارائی واکسنهای نوترکیب گیاهی، انتقال ژن عامل بیماری به گیاه به منظور تولید آنتی ژن با مقدار و کیفیت مناسب و استفاده از آن در خوراک ماهی میتواند یکی از راههای موثر در پیشگیری از بیماری باشد. در این مطالعه ژن
پژوهشگران: لیلا فاضلی دکتر پوران گلکار، دکتر ندا میر آخورلی، دکتر سید امیر حسین جلالی، رضوان محمدی نژاد.:
یکی از مشکلات عمدهی مزارع پرورش ماهی متراکم، بیماریهای عفونی ماهیان و انتقال آسان بیماری بین ماهیان میباشد. سالانه خسارتهای بسیار زیادی در اثر انواع بیماریهای مختلف به مزارع پرورش ماهی وارد میشود و پرورشدهندگان برای مبارزه با بیماریها به استفاده از آنتیبیوتیکها روی آوردهاند. بیماری ویروسی نکروز عفونی مراکز خونساز ماهی قزلآلا (IHNV) در ماهی قزل آلا سالیانه خسارات بسیار هنگفتی را به بخش تولید ماهیان سرد آبی در جهان میزند. عمده تلفات در ماهیان کمتر از 100 گرم تا 70 درصد و بالای وزن 100 گرم کمتر از 20 درصد در مجتمعهای پرورشی استانهای لرستان، چهار محال بختیاری، کهکیلویه و بویراحمد، کردستان، کرمانشاه و اصفهان بوده است.ژنوم این ویروس یک RNAی خطی با 11000 جفت باز می باشد که حاوی شش ژن با نامهای N ,P ,M G,NV و L می باشد. ژن G با توجه به اینکه یک گلیکو پروتئین سطحی را کد میکند، باعث افزایش بیماریزائی میگردد، اهمیت زیادی در قدرت بیماریزائی ایفا میکند و حدود 360-720 جفت نوکلئوتید دارد. تولید واکسن نوترکیب بر علیه بیماری ویروسی نکروز عفونی مراکز خونساز میتواند راه کار بسیار مفیدی جهت مقابله و ایجاد ایمنی در ماهیان باشد. با توجه به اهمیت اقتصادی و کارائی واکسنهای نوترکیب گیاهی، انتقال ژن عامل بیماری به گیاه به منظور تولید آنتی ژن با مقدار و کیفیت مناسب و استفاده از آن در خوراک ماهی میتواند یکی از راههای موثر در پیشگیری از بیماری باشد.در این مطالعه ژن G ویروس نکروز عفونی مراکز خونساز جهت بیان در سیستم گیاهی کلون گردید و بعد از انتقال موقت به گیاه، بیان پروتئین نوترکیب مورد بررسی قرار گرفت. برای ساخت سیستم تظاهر ژن G، ژن G موجود در پلاسمید pCDNA تکثیر و جداسازی گردید. سپس ژن G و پلاسمید pPZPY122 با آنزیمهای برشی BamHI و KpnI برش خورده و لایگیشن انجام شد. سپس پلاسمید نوترکیب در باکتری E.coli سویه DH5α کلون گردید. برای بررسی کارایی سیستم بیانی ساخته شده ابتدا پلاسمید نوترکیب استخراج و به اگروباکتریوم سویه GV منتقل و سپس با استفاده از روش اگرواینفیلتریشن به گیاه لوبیا انتقال داده شد.